Vereanalüüsi normi dešifreerimine ELISA jaoks
ELISA või ensüümiga seotud immunosorbentne test on kaasaegne viis paljude patoloogiate, sealhulgas nakkuslike patoloogiate kindlaksmääramiseks. Uuring viiakse läbi laboris. Meetodi peamine eesmärk on antikehade tuvastamine, nende olemasolu näitab patogeensete ainete tungimist kehasse. Kaasaegne meditsiin kasutab ELISAt paljude haiguste diagnoosimiseks ja kolmandate isikute ühendite tuvastamiseks.
ELISA: millal ja kuidas
ELISA abil suudavad spetsialistid tuvastada spetsiifiliste antikehade (immunoglobuliinide) olemasolu vereseerumis ja määrata antigeenid. Immunoglobuliinid tekivad keerukate närviprotsesside tõttu, mida viivad läbi keha kaitsefunktsioonid. Need on loomulik immuunvastus võõraste ainete tungimisele. Igat tüüpi patogeeni jaoks toodetakse spetsiifilisi antikehi..
Oluline: vastavalt teatud komplekside olemasolule võimaldab ensüümidega seotud immunosorbentide test tuvastada patogeeni tüüp inimkehas.
Diagnoositakse ELISA abil järgmiste haiguste tuvastamiseks:
- herpes
- hepatiidi viiruse tüüp;
- Epsteini-Barri viirus (4. tüüpi herpes);
- tsütomegaloviirus.
Vereanalüüs võimaldab teil tuvastada peamised patogeensed bakterid, mis provotseerivad süüfilise, ureaplasmoosi ja trihhomonoosi arengut. Analüüsi abil määravad eksperdid antikehad 600 allergeeni tüübi vastu. Elundi siirdamise ettevalmistamiseks on sobiv ensüümi immuunanalüüs..
Tähtis: mõnel juhul on ELISA inimkeha onkoloogia määramiseks täiendav meetod.
Analüüs viiakse läbi eranditult laboris. Uuringu jaoks võetakse veenivere ulnarveenist. Analüüsi tulemused on saadaval järgmisel päeval. Usaldusväärse teabe saamiseks soovitavad eksperdid järgida ELISA-le ettevalmistamise reegleid:
- päev enne uuringut on vaja loobuda vürtsika ja suitsutatud toidu kasutamisest;
- alkohol on keelatud;
- verd antakse hommikul tühja kõhuga;
- Enne uuringut on vaja välistada igasugune füüsiline ja emotsionaalne stress;
- suitsetamisest loobuda.
Tähtis: kõigi ettevalmistavate soovituste järgimine võimaldab teil saada usaldusväärse tulemuse..
Milliseid patoloogiaid ensüümi immuunanalüüs tuvastab
Ensüümi immuunanalüüsi abil määrab spetsialist immunoglobuliinide erinevad klassid, mille olemasolu näitab kehas patoloogiliste protsesside arengut. ELISA peamised näitajad on IgM ja IgG. IgM immunoglobuliini olemasolu näitab ägeda patoloogilise protsessi arengut. Vere IgG on iseloomulik taastumisetapile.
ELISA analüüsi abil tuvastavad eksperdid hulga ohtlikke haigusi. Need sisaldavad:
- viirusliku tüübi patoloogia. Eelkõige punetised, gripp, hepatiit ja herpeedilised haigused;
- bakteritüübi patoloogia. Nende hulka kuuluvad tuberkuloos, difteeria ja läkaköha;
- nakkusliku tüübi patoloogia. Eelkõige kopsupõletik, sepsis, klamüüdia, tonsilliit ja püelonefriit;
- parasiiditüübi patoloogia;
- seenhaigused.
Tähtis: süüfilise kinnitamiseks on ette nähtud ELISA, kui vere annetamine PB-le on positiivne.
Õigeaegne diagnoosimine võimaldab teil jälgida teraapia efektiivsust ja vajadusel seda kohandada.
Analüüsi dekrüptimine: positiivne ja eitav vastus
ELISA tulemuste dekrüpteerimist teostab spetsialist saadud andmete põhjal. Vastus võib olla kas positiivne või eitav..
Positiivne IFA
Tulemust peetakse positiivseks, kui uuringu käigus tuvastati veres IgG ja IgM klassi immunoglobuliinid. Esitatud komponentide olemasolu näitab järgmiste haiguste arengut:
- süüfilis;
- hepatiidi viiruse tüüp;
- CMVI (tsütomegaloviirus);
- herpes
- tuulerõuged;
- stafülokokkide ja streptokokkide provotseeritud haigused;
- klamüüdia.
Süüfilise arenguga leitakse veres spetsiifilisi antikehi 14 päeva pärast nakatumist. Nende arvu järgi määrab spetsialist haiguse kulgu raskusastme. Süüfilise aktiivravi kõrvaldab kõik bakterid 6 kuu pärast. Kui ravi pole, kulub keha täielikuks taastamiseks vähemalt 1,5 aastat.
ELISA näitab hepatiidi viiruse tüüpi inkubatsiooniperioodil enne esimesi sümptomeid.
CMVI on tavaline patoloogia, mis esineb igal kolmandal inimesel. Elanikkonna jaoks pole see ohtlik, nakatumine toimub emakas.
Tavaliselt puuduvad inimese kehas herpeediviiruse antikehad. Nende avastamisel on tavapärane diagnoosida haiguse äge faas.
Tuulerõugete arenguga leitakse inimese veres spetsiifilisi IgM immunoglobuliine. Pärast patoloogia täielikku kõrvaldamist suudavad nad kehas püsida 2 aastat.
Streptokokkidest ja stafülokokkidest põhjustatud haiguste kindlakstegemiseks võimaldab ELISA-l teha kahesuunalist analüüsi. Uuesti uurimisel tõuseb spetsiifiliste antikehade tase kiiresti.
Klamüüdia arengut näitab kõrge immunoglobuliini tase - 1: 8 ja kõrgem. Indikaator võib varieeruda sõltuvalt haiguse progresseerumisest..
Tähelepanu: teatud patoloogilise protsessi arengu kinnitamiseks määrab spetsialist täiendavad laboratoorsed ja instrumentaalsed uuringud. Põhjalik uuring võimaldab teil määrata tõhusa raviskeemi.
Negatiivne IFA
Negatiivse tulemusega ei tuvastata inimese veres spetsiifilisi IgM-klassi immunoglobuliine. Võib-olla võivad IgG olemasolu, antikehad kehas püsida ka pärast haigusi, baktereid ja viirusi. Mõnel juhul püsib nende esinemine vereseerumis aastakümneid.
Tähelepanu: analüüsi tulemusi õigesti dekrüpteerida suudab ainult kogenud spetsialist.
Vastuste sõltumatu uurimine viib enamikul juhtudel diagnoosimise ja ebaõige ravi määramise katseteni ilma arsti osaluseta. Sellist mõju peetakse ideaalseks patoloogilise protsessi edasiseks progresseerumiseks..
Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs: dekodeerimine, meetodid
Seotud teaduste, nagu geneetika, molekulaarbioloogia, keemia, arenguga, aga ka tehnoloogia arenguga, on tänapäeva meditsiinis uhkeid meetodeid mitmesuguste inimhaiguste diagnoosimiseks. Neid iseloomustab tulemuste kõrge täpsus ja töökindlus. Üks neist terviseprobleemide tuvastamise viisidest on ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs. See on saavutanud viimase kümnendi jooksul laialdase populaarsuse ja saavutanud maine kui ülitõhus, usaldusväärne ja patsiendisõbralik meetod haiguste tuvastamiseks juba enne väliste sümptomite ilmnemist. Selgitame hõlpsalt, mis on seda tüüpi diagnoos, mis on selle toimimise põhimõte, märgime ära eelised, orienteerume sellise analüüsi maksumuses.
Keha reaktsioon patogeensele floorale
Selleks, et mõista, kuidas tänu ensüümidega seotud immunosorbentide testile diagnoosivad laboritehnikud mitmesuguseid haigusi, on vaja mõista füsioloogilist protsessi, mis toimub kehas infektsioonide nakatumise ajal. Kui patogeenne mikroorganism siseneb vereringesse, näitab inimese immuunsussüsteem kaitsvat reaktsiooni teatud ainete - antikehade - vabanemise näol. Nad seovad rakuga ja analüüsivad, kas see on kehaosa või on tunginud väljastpoolt. Kui immuunsussüsteem tuvastab, et rakk on võõras, siis patogeense mikroorganismi vastu võitlemiseks hakkab antikehade arv suurenema.
Antikehi on mitmesugusel kujul ja neil on oma eripärad. Mõned ained ilmuvad vahetult nakkusperioodil, teised püsivad kogu inimkehas elu jooksul ja tänu neile kujuneb välja stabiilne immuunsus konkreetse haiguse vastu. Valgu struktuurid jagunevad järgmisteks tüüpideks: A, D, E, M, G. Meditsiinis nimetatakse antikehi immunoglobuliinideks. Seetõttu on tavaks määrata nende ainete näitajad ladina tähtedega Ig.
Ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs (ELISA) põhineb meditsiiniliste teadmiste andmetel. Spetsiaalsete antigeenide abil laboris on võimalik kindlaks teha bioloogilises materjalis teatud antikehade olemasolu või puudumine. Sellise analüüsi tulemuste põhjal saab arst patsiendi jaoks ohu taseme tuvastamiseks diagnoosi teha, samuti määrata mitte ainult patoloogia olemasolu, vaid ka selle päritolu piiramist. Ensüümi immuunanalüüsis uuritakse kõige sagedamini M- ja G-rühma antikehade olemasolu..
Mis on IFA??
Tegelikult ei ole ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs kaasaegses ühiskonnas uuendus. See leiutati tagasi 80ndatel. Kuid selliste uuringute läbiviimiseks oli vaja mahukaid kalleid seadmeid. Seetõttu kasutati seda meetodit ainult spetsiaalselt varustatud teaduslikes laborites: seda kasutati rakkude ja kudede tüpiseerimiseks. Kuid siis ei olnud ta diagnostilises meditsiinis laialdast levikut, selle kasutamine oli tehniliselt keeruline ja äärmiselt kallis. ELISA paranes ainult tehnoloogia arendamise ja biopolümeermaterjalide leiutamisega. Pärast seda meetodit hakati populariseerima ja saavutama usalduse meditsiiniringkondade vastu.
Nagu eespool mainitud, hõlmab see meetod teatud immunoglobuliinide rühmade tuvastamist biomaterjalis - veri, amniootiline vedelik, klaaskeha või tserebrospinaalvedelik.
On olemas uuringuid ilma antigeeni pinnale kandmata ja ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsi, mis hõlmab reaktsiooni spetsiaalsetes süvendites. Viimati nimetatud meetodil on suur tundlikkus ja usaldusväärsus, mistõttu tehakse sel viisil meditsiinilaborites inimhaiguste tuvastamiseks analüüs..
Ensüümi immuunanalüüs
Sõltuvalt väidetavast haigusest kasutatakse vajalikku antigeeni ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsi komplektist, mis keemilise reaktsiooni ajal nakkuse juuresolekul puutub kokku patogeense flooraga. Seda protsessi nimetatakse immuunvastuseks..
Seejärel viige uuringu tulemuse visuaalseks määramiseks läbi ELISA ensümaatiline faas. See hõlmab materjali värvimist spetsiaalsete reagentide abil. Selles uuringus kasutatakse selliseid ensüüme nagu aluseline fosfataas, peroksüdaas ja avidiin. Sõltuvalt keemiliste reaktsioonide käigus saadud värvusest määratakse ensüümi immuuntesti tulemus.
Mis on kolorimeetria??
Diagnoosimise ensümaatilise faasi analüüsimisel kasutatakse meetodit, mida nimetatakse "kolorimeetriaks". Fakt on see, et mitte ainult materjali värv ei anna teavet nakkuse kohta, vaid ka keemiliste reaktsioonide tagajärjel tekkivat värvi tihedust. Just see indikaator määrab patogeense mikroorganismi kontsentratsiooni. Kui vanasti kasutatakse käsitsi diagnoosimise meetodit, siis nende indikaatorite määramiseks on loodud spetsiaalne kalibreerimisgraafik.
Kaasaegsetes laborites kasutatakse tänapäeval manuaalset meetodit harva. ELISA analüüsiks kasutatakse spetsiaalset aparaati - kolorimeetrit, milles seadistatakse käsitsi ainult uurimisparameetrid ja seejärel tehakse kogu töö, sealhulgas joonistamine, automaatselt.
ELISA meetodid
On olemas otseseid ja kaudseid ensüümide immuunanalüüsi meetodeid. Esimene vaade võtab vähem aega, kuna sellel on ainult 3 täitmisetappi. Esiteks lisatakse spetsiaalsetesse süvenditesse asetatud uuritava materjali antigeenidele spetsiifilised antikehad. Seejärel eemaldage nende liigne kogus ja viige läbi analüüsi ensümaatiline etapp, saades tulemuse.
Kaudset meetodit kasutatakse palju sagedamini, kuna selle tundlikkus on otsesest diagnoosimismeetodist kõrgem. Selle läbiviimisel kasutatakse kahekordset uuringut. Nimelt seostatakse antigeen esmalt märgistamata antikehaga ja seejärel märgistatud antikehaga. See protsess võtab rohkem aega, kuid tulemus on kõige täpsem..
Reaktiivide komplektid
Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüside komplekte toodavad erinevad tootjad väga erinevates konfiguratsioonides. Venemaal on tunnustatud ettevõte Meditsiini ja Bioloogia Liit. See tootja toodab reagentide komplekte peaaegu kõigi meie laiuskraadidel levinud nakkuste ELISA uuringute jaoks, mida saab sel viisil analüüsida. Lisaks reagentidele endile on komplektidesse lisatud täiendavaid materjale, mis tagab analüüside ohutuse, mugavuse ja kiiruse. Lisaks sellele värvitakse keemilisi aineid erinevat värvi, mis vähendab vea tõenäosust reaktiivi labori abistaja valimisel.
Keemilis-bioloogilised komplektid erinevad suhtelise ligipääsetavuse osas, mis mõjutab otseselt ensüümide immunoanalüüsi jaotust ja kättesaadavust elanikkonnale.
Diagnostilise meetodi eelised
Kahtlemata on ensüümi immuuntestil võrreldes teiste diagnostiliste meetoditega mitmeid eeliseid:
- Selle abil saate kindlaks teha isegi patogeensete organismide ebaolulise esinemise, mis näitab testi kõrget tundlikkust..
- Võimalus tuvastada haigus varasemates staadiumides, mis suurendab oluliselt eduka ravi võimalust.
- Bioloogilise materjali võtmise lihtsus ja mugavus. Sellist analüüsi tehakse nii eralaborites kui ka riiklikes laborites. Vajadusel võib õde võtta materjali patsiendilt koju.
- Analüüs nõuab väga väikest kogust biomaterjali.
- Kiire tulemus. Kaasaegsed meditsiiniseadmed võimaldavad teil päeva jooksul analüüse teha.
- Võimalus tuvastada varjatud asümptomaatilisi nakkusvorme.
- Õppe kättesaadavus.
- Vajadusel on selle meetodi abil võimalik läbi viia massiuuringuid..
- Haiguse kulgu ja ettenähtud ravi efektiivsust on võimalik jälgida, kuna ELISA-analüüsi on patsiendile mitu korda täiesti ohutu teha võimalik.
- Analüüsi etappide automatiseerimine, mis välistab inimfaktori ja suurendab tulemuste usaldusväärsust.
- ELISA reaktiive säilitatakse pikka aega - umbes aasta.
- Analüüs on võimalik ümbritseva õhu temperatuuri kõikumiste korral..
M-rühma immunoglobuliinid
M-rühma antikehad toodetakse immuunsussüsteemi poolt kohe pärast võõra antigeeni tuvastamist. Seega, kui ensüümi immuunanalüüs lõppes selliste ainete tuvastamisega biomaterjalis, näitab see haiguse kulgu ägedat staadiumi, esmast infektsiooni. M-rühma immunoglobuliinid võivad kehas olla sõltuvalt nakkuse tüübist kuni kuu. Siis väheneb nende arv täieliku kadumiseni.
G-rühma immunoglobuliinid
Näib, et G-tüüpi proteiinistruktuurid asendavad rühma M immunoglobuliine. Need ained tekitavad haiguse suhtes stabiilse, enamasti elukestva immuunsuse. IgG valgu struktuuri määramine uuritavas materjalis näitab, et keha on varem patogeeniga kokku puutunud ja tal on kaitsva reaktsiooni nakatumise eest.
Diagnoosimise näidustused
Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi kasutatakse mitmesuguste nakkushaiguste, hormonaalsete seisundite ja allergiatestide määramiseks. Nimelt:
- määrake kilpnäärmehormoonide tase;
- reproduktiivse hormonaalse paneeli näitajad;
- kasvaja markerid;
- nakkushaiguste, näiteks tsütomegaloviiruse, hepatiidi, toksoplasma, punetiste, leetri, tuberkuloosi, klamüüdia, süüfilise, mükoplasma, ureplasma, Candida, giardia ja isegi HIV patogeenide tuvastamine;
- nad diagnoosivad autoimmuunhaigusi. Sealhulgas ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs: kilpnäärmehormoonide uurimiseks kasutatakse sageli TSH, TG, T3 ja T4.
Lisaks diagnostilistele eesmärkidele kasutatakse ensüümidega seotud immunosorbentide testi meditsiinilistes uuringutes.
Kuidas materjali võetakse??
Enamikul juhtudel on analüüsiks soovitatav veenide vereproovid. Pärast uuringu materjali töötlemist ja ettevalmistamist viiakse läbi ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs vereseerumi või plasma jaoks.
Hormonaalse paneeli uurimine nõuab erilist tähelepanu, kuna sel juhul on äärmiselt oluline arvestada materjali omastamise omadustega. Näiteks enamiku hormoonide diagnoosimiseks naise reproduktiivsüsteemis tuleb menstruaaltsükli teatud päevadel võtta venoosset verd. Välised tegurid mõjutavad paljusid teisi hormoone: hooajalisus, kellaaeg, patsiendi psühholoogiline seisund ja palju muud. Spetsiifilisi tegureid arvestamata võite saada vale tulemuse, mis põhjustab haiguse ägenemist või valesti määratud ravi.
Mõnel, sagedamini keerulisel juhul võib analüüsideks vaja minna rase naise tserebrospinaalvedelikku, klaaskeha või amnionivedelikku. Nende bioloogiliste materjalide kogumise protseduuridel on teatav oht, neil on vastunäidustused ja taastumisperiood. Seetõttu tuleks sellist ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsi teha ainult arsti tunnistuste kohaselt ja tema professionaalse järelevalve all. Dekrüptimine nõuab sel juhul spetsiaalseid meditsiinilisi teadmisi ja see võib võtta natuke aega.
Analüüsi ettevalmistamine
Kõigist soovitustest lähtudes tuleks läbi viia ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs, kuna välised tegurid mõjutavad uuringu tulemusi. Näiteks on oluline annetada venoosset verd tühja kõhuga hommikul (kuni 11 tundi). 2 nädalat enne väidetavat materjali tarbimist peate lõpetama ravimite, eriti hormoonide, võtmise. Mõni päev enne uuringut peaksite hoiduma alkoholi ja rasvaste toitude tarbimisest ning välistama ka füüsilise aktiivsuse, mured ja stressid..
Tulemuste dešifreerimine
Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi tulemuste dešifreerimiseks on vaja eriteadmisi ülalkirjeldatud valgustruktuuride (antikehade) omaduste kohta (IgG ja IgM). Nende andmete kohaselt analüüsitakse uurimisnäitajaid. Tabelis kirjeldatakse valikuid, mida saab analüüsi käigus saada:
Immunoglobuliinid M | Immunoglobuliinid G | Väidetav dekrüptimine |
negatiivselt | negatiivselt | Keha pole seda nakkust kunagi kogenud. Sellel pole patogeeni ega antikehi. |
negatiivselt | positiivselt | Keha on välja töötanud tugeva immuunsuse infektsioonide vastu.. |
positiivselt | negatiivselt | Infektsiooni äge vorm. |
positiivselt | positiivselt | Tõenäoliselt esmane infektsioon, kuid on vaja täiendavaid diagnostilisi teste. |
Esitatud tabelit analüüsides võime järeldada, et enamikul juhtudel on diagnoosi kinnitamiseks vaja täiendavaid uuringuid. Ensüümiga seotud immunosorbentne analüüs üksi ei saa anda kindlat vastust. Sel juhul pole normil selgeid piire: G-rühma tuvastatud valgud näitavad ainult seda, et keha on varem nakatunud kindlaksmääratud patogeeniga. Kuid sama tulemus võib viidata ägeda faasi esinemisele - õige diagnoosi seadmiseks on oluline võrrelda paljusid tegureid ja näitajaid.
Riskitegurid
ELISA on 90% täpne. Sellegipoolest on diagnostilise tulemuse moonutamist mõjutavaid riskifaktoreid: seadme rike, materjali ebaõige kogumine, ladustamine ja transport, muude välistegurite arvestamine.
Pärast vereülekannet, hemolüüsi, operatsiooni, bioloogilist materjali ega bioloogilise materjali punktsiooni pole soovitatav diagnoosida - see võib mõjutada ka indikaatorite tulemusi.
Analüüsi hind
Diagnostilise uuringu maksumus on lai ja see sõltub analüüsi tüübist ja määratavast antigeenist, kuna nende tegurite põhjal arvutatakse reagentide komplektide maksumus ja määratakse analüüsi keerukus. Kuid enamikul juhtudel on ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs saadaval paljudele patsientidele. Selle hind on alates 300 r. kuni 2000 r.
ELISA on taskukohane, kiire ja väga tõhus meetod suure hulga haiguste diagnoosimiseks. Kuid tulemuste dešifreerimiseks ja diagnoosi määramiseks on õigus ainult kvalifitseeritud meditsiinitöötajal.
Mis on ELISA vereanalüüs ja miks see on diagnoosimisel oluline?
ELISA vereanalüüs, mis see on? Tõenäoliselt mäletavad kõik, et vastusena viiruste tungimisele nende vastu võitlemiseks hakkab keha tootma antikehade komplekse. Nendel immunoloogilistel ühenditel on võime oma patogeeni ära tunda ja hävitada. See on uuringu alus, mis võimaldab teil kindlaks teha konkreetsele haigusele omaste immunoensüümide olemasolu ja koguse.
Mõned üldised analüüsiandmed
ELISA ehk ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs võimaldab määrata spetsiifilisi patogeeni tüüpi antikehi (immunoglobuliine). ELISA meetod põhineb järgmisel:
- vastusena mikroorganismi sissetoomisele hakkab immuunsüsteem tootma antikehi;
- immunokompleksid on spetsiifilised ja hävitavad ainult võõraid rakke;
- kui patsiendi vereseerumisse lisatakse patogeeni ekstrakti, moodustub antikehade olemasolul standardühend: antikeha-antigeen ja ensüümid vabanevad aktiivselt.
Labori positiivse või negatiivse testi põhjal hinnatakse, kas reaktsioon toimus plasmas pärast patogeeni lisamist sellele ja kui intensiivne oli protsess..
Tervisliku inimese norm on üksikud immunokompleksid või nende puudumine.
ELISA ei näita konkreetset haigust, see soovitab ainult teatud tüüpi patogeeni, mis põhjustas immunokomplekside ilmnemise ja määrab kindlaks põletikulise protsessi staadiumi. See võimaldab teil kohandada edasisi diagnostilisi meetodeid..
Immunoglobuliinide kohta
Mis on immunoglobuliin, mõistavad paljud: immuunkompleks, mis moodustub vastusena võõraste rakkude tungimisele. Aga mis need on?
ELISA meetod võimaldab teil valida 5 immunoglobuliinide sorti:
Diagnoosimisel on peamised A, M ja G (mõned diagnostilised allikad tähistavad ainult neid kolme immuunkompleksi), seega tasub kaaluda nende omadusi:
- A - vastutab limaskestade kaitsmise eest. Ägedate patoloogiate korral ilmub see veres 14 päeva pärast nakatumist ja mõnikord hiljem ning kaob 8 nädala jooksul alates haiguse sümptomite ilmnemisest. Kui IgA immunokompleks kestab kauem, siis võime eeldada haiguse üleminekut krooniliseks vormiks. Viirusetõrje A näitab kusepõie, soolte või hingamissüsteemi limaskesta kahjustusi.
- M - on haiguse ägeda faasi indikaator. Vereplasmas täheldatakse seda 5 päeva pärast nakatumise hetke (isegi kui haigusel pole väljendunud tunnuseid) ja kaob kuue nädala pärast, kui äge protsess laheneb.
- G - jääkreaktsioon ja immunokompleksid püsivad pikka aega (mõnikord kogu elu) ja takistavad uuesti nakatumist või ägenemiste teket. Vaktsineerimise põhimõte põhineb antikehade G moodustumisel, kui inimesel tekib nõrgestatud mikroobide ja viiruste sissetoomisega pikaajaline immuunsus. Suurenenud G - näitaja, et patogeen sisenes uuesti kehasse või süvendas kroonilist infektsiooni.
Ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs E ja D kohta kohustuslikku kontrolliprogrammi ei kuulu. Ravim on ette nähtud järgmistel juhtudel:
- E - kui pakutakse, et patoloogia põhjustavad parasiidid;
- D - kui on võimalus, et patoloogia on süsteemne või ilmnenud immuunpuudulikkuse tõttu.
ELISA vereanalüüs võimaldab tuvastada väliste ainete spetsiifilisi antikehi juba patoloogia varases staadiumis. Testimine põhineb standardsel antigeeni-antikeha reaktsioonil, mis võimaldab tuvastada patogeeni vastaseid antikehi..
Näidustused laboratoorseks diagnoosimiseks
Vereanalüüs ensüümi immuunanalüüsi jaoks on näidustatud järgmiste patoloogiate esinemise kahtluse korral:
- onkoloogia;
- viirushepatiit (igat tüüpi viirusega);
- limaskesta või naha herpeetilised kahjustused;
- mõned nakkuslikud protsessid (salmonelloos, leetrid, entsefaliit, düsenteeria);
süüfilis; - suguhaigused (gonorröa, klamüüdia, mükoplasmoos jne);
- atoopilised protsessid (allergiad);
- tsütomegaloviirus;
- sisesekretsioonisüsteemi häired;
- immuunpuudulikkus;
- viljatus;
- helmintiaalsed infestatsioonid.
ELISA vereanalüüs võimaldab teil ennustada mõne mittenakkusliku haiguse kulgu:
- südameatakk;
- insult;
- neuroloogilised häired;
- neerupatoloogiad.
Profülaktilise abinõuna viiakse ELISA läbi ka füüsiliste uuringute ajal..
ELISA diagnoos võimaldab tuvastada enam kui 600 nakkuslike ja mittenakkuslike antigeenide antikehi, mis muudab uuringu haiguse varase staadiumi tuvastamisel hädavajalikuks. ELISA-d peetakse kõige informatiivsemaks, kui seda on testitud HIV ja onkoloogia osas.
Millel tehnika põhineb?
Näib, et immunoglobuliine on ainult viis ja nende abiga määratakse suur hulk patoloogilisi protsesse. Kas see on võimalik?
Võib olla. Põhjuseks on see, et immunoglobuliiniühendite arvutamine toimub erinevate testide alusel:
- tuumavastased kehad (näitavad autoimmuunseid protsesse);
- reumatoidfaktor (näitab reumaatilisi kahjustusi);
- kaheahelaline DNA (tuvastatakse süsteemsete haiguste korral ilmnev valkude rühm);
- ENA ekraan (määratleb mitut tüüpi antigeene, mis on iseloomulikud reumaatilisele tegurile või süsteemsetele sidekoe kahjustustele);
- antikardiolipiini antikehad (immunokompleksid moodustuvad HIV, epilepsia ja mõnede süsteemsete protsesside korral);
- ANGA ekraan (ühendid, mis on iseloomulikud autoimmuunsetele protsessidele);
- tsitrulliinpeptiid (antikehad ilmuvad reumatoidartriidiga);
- C-reaktiivne valk (C-reaktiivne valk näitab ägeda haiguse esinemist või kroonilise protsessi ägenemist);
- immunofluorestsentsanalüüs (näitab hormonaalset ebaõnnestumist või pahaloomuliste kasvajate esinemist).
Analüüsi tõlgendamisel võetakse arvesse kasutatud tehnikaid. Saadud andmete hindamine on üsna keeruline ja seda teostab arst. Patsientide jaoks, kes soovivad enne arsti külastamist laborist saadud andmeid iseseisvalt analüüsida, võib pakkuda järgmist tabelit:
Tabelis on esitatud ainult üldine teave. ELISA analüüsis võetakse arsti poolt dešifreerimisel arvesse mitte ainult ensüümide immuunanalüüsiühendite olemasolu, vaid ka nende kogust ning uuringu läbiviimiseks kasutatud meetodeid.
Meetodi eelised
ELISA-analüsaatorit kasutatakse sageli haiguste diferentsiaaldiagnostikas ja ravi kvaliteedi jälgimiseks. Sellel tehnikal on mitmeid eeliseid:
- Odavus. Diagnostikakomplektid on suhteliselt odavad.
- Lihtsus. Ei ole vaja varustada keerukate seadmetega ja uuringut saab läbi viia igas laboris.
- Suur infosisu. Antigeeni tüübi määramise usaldusväärsus on umbes 90%.
- Kiirus. IFA analüsaator on automatiseeritud, erakorralise töö laboratooriumis saab uuringute andmeid hankida mõne tunni jooksul pärast biomaterjali tarnimist.
- Varane diagnoosimine. Immunoglobuliinid ilmuvad veres haiguse algfaasis.
- Ladustamise kestus. Patsiendilt võetud materjali saab säilitada kuni aasta.
- Haiguse staadium. Plasmas leiduvate immunoglobuliinide suhe ja põhinäitajad võimaldavad kindlaks teha haiguse kulgu ja staadiumi.
- Dünaamika juhtimine. ELISA ravi ajal võimaldab ensüümidega seotud immunosorbentide test korrigeerida käimasolevat ravi sõltuvalt laboratoorsetest parameetritest.
- Biomaterjalide kogumise lihtsus. Diagnoosimiseks piisab väikesest kogusest venoosset verd.
ELISA vereanalüüs on väga informatiivne ja võimaldab tuvastada patoloogiat arengu algfaasis, kuid ainult laboratoorse uuringu põhjal diagnoosi ei tehta. Lõplik diagnoosimine on võimalik alles pärast patsiendi täielikku uurimist.
Meetodi puudused
Hoolimata paljudest eelistest on immunofermentatsiooni abil tehtud vereanalüüsil mõned puudused:
- võimetus määrata patogeeni tüüpi 100% täpsusega (mõne haiguse korral toodetakse sarnaseid immunoglobuliine);
- valepositiivse tulemuse saamise tõenäosus (see juhtub rasedatel või kui ei järgita analüüside ettevalmistamise reegleid).
Diagnoosi täpsust võivad mõjutada järgmised asjaolud:
- suitsetamine ja joomine;
- närvipinge või stress;
- füüsiline koormus;
- teatud ravimite võtmine (verd saab annetada alles 10 päeva pärast ravimi ärajätmist).
Need ELISA vereanalüüsi puudused ei takista arstidel tunnistada seda tehnikat kõige mugavamaks ja informatiivsemaks haiguste avastamiseks varases staadiumis. Vajaduse korral võib laborist saadud andmete täpsustamiseks määrata patsientidele täpsemad testid, mis võimaldavad patogeeni tüüpi täpsemalt kindlaks teha.
ELISA parasitoloogias
IgE on iseloomulik helmintoossetele sissetungidele, kuid võib ilmneda vereplasmas ja koos mõne allergiaga (seda on veres väikeses koguses). Vaatamata valepositiivsete reaktsioonide saamise tõenäosusele määravad parazitoloogid sageli vereanalüüsi ELISA-le, et tuvastada järgmist tüüpi parasiidid:
- helminte;
- toksoplasma;
- amööb;
- trihhinella;
- Giardia
- algloomad;
- lamedad ussid.
Helmintiaalsed infestatsioonid, nagu nakkuslikud patogeenid, põhjustavad antikehade tootmist E. Selle markeri kasv veres näitab peaaegu alati parasiitide esinemist kehas (atoopiliste reaktsioonide ajal püsib see samal tasemel või suureneb veidi).
Parasiidid ei paikne tingimata soole limaskestal, need võivad tungida neerude, südame ja muude organite kudedesse. Kui uuritud väljaheites on munarakkude, vastsete või täiskasvanud isendite abil soolestikus parasiteerumist hõlpsasti tuvastatav, tehakse muude kudede kahjustused ainult ensüümi immuuntesti abil.
Nüüd on paljud aru saanud, mis on ELISA, ega karda enam salapärast laboratoorset kokkutõmbumist. Tõepoolest, uuring on määratud mitte ainult haiguste kinnitamiseks. Mõned ensüümidega seotud immunosorbentide testid (süüfilis, HIV) on osa kohustuslikust tervisekontrolli programmist ja negatiivse tulemuse saamine on tervise näitaja. Ja kui testimine osutub positiivseks, siis pole see paanika põhjuseks: mida varem avastatud haiguse ravi alustatakse, seda soodsam on prognoos.
STD-de diagnoosi kirjeldus: ensüümi immuunanalüüs (ELISA)
Saadaolevate diagnostiliste meetodite loetelu on viimastel aastakümnetel kiiresti laienenud, diagnoosijad proovivad kõigi varasemate analüüside eeliseid ühendada uutes meetodites, vabanedes kõigist eelnevatest puudustest.
Hiljuti ilmneb diagnostiliste protseduuride loendis sagedamini ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs - moodne ja üsna uus test, mille kohta tavalisele inimesele, kes pole meditsiiniga seotud, on vähe teada. Sellele vaatamata laiendab see tehnika kvalifitseeritud meditsiinitöötajate seas kiiresti oma järgijate ringi. Mis see on ja mis juhtudel seda tuleks kasutada, võite proovida seda välja mõelda, tutvustades selle omadusi ja peamisi omadusi.
Meetodi olemus
Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs on instrumentaalne ja laboratoorne tehnika, mis põhineb molekulaarse antigeeni-antikeha reaktsioonil, mis võimaldab bioloogilistes materjalides tuvastada spetsiifilisi valke (uuritavad proovid). Sellisteks valkudeks võivad olla ensüümid, mitmesugused mikroorganismid (viirused, bakterid, seened), algloomad jne..
Pärast meetodi avastamist anti talle nimi ELISA test, mis pole avastajate nimega seotud, kuid on ingliskeelses versioonis esineva täisnime lühend - ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs. Arstid kogu maailmas kasutavad seda nime, mõned venekeelsete riikide arstid kutsuvad seda tüüpi uuringuteks ka.
Meetodi peamine põhimõte on antigeeni-antikeha molekulaarne reaktsioon.
Antigeen on mis tahes võõrmolekul, mis siseneb inimese kehasse haiguse mikroobide põhjustaja osana. Antigeenid on tavaliselt valgu molekulid. Lisaks mikroorganismidele võivad selliseks “võõraks” olla võõra vere rakud, mis ei lange kokku rühma- või Rh-faktoriga.
Vastusena sellise antigeeni sissetungimisele käivitub kehas immuunreaktsioon, mille eesmärk on kaitsta võõraste molekulide eest. See toimub immuunsussüsteemi spetsiaalsete ainete - antikehade (immunoglobuliinide) sünteesi tõttu. Iga antikeha sobib ainult konkreetse antigeeni jaoks ja neutraliseerib patogeense "võõra", viies selle kokku ühe kompleksiga. Sellise seondumise protsessi nimetatakse antigeeni-antikeha reaktsiooniks.
Antikehade tüübid
Kõik antikehad (immunoglobuliinid) jagunevad viide tüüpi, sõltuvalt sellest, millises immuunvastuse staadiumis need ilmuvad:
- M-klass (IgM). Selliste immunoglobuliinide kasvu võib täheldada juba esimestel päevadel pärast nakkuse või muu patogeense toimeaine sissetoomist. Umbes 6 nädala pärast hakkavad nad lahustuma ja kaovad..
- G-klass (IgG). Haiguse ületamiseks sünteesitakse neid teises etapis. Pärast võõraste molekulide täielikku elimineerimist on neid veres jätkuvalt väheses koguses, et tagada immuunsus uuesti nakatumise korral.
- A-klass (IgA). Sellised immunoglobuliinid vastutavad keha limaskestade kaitsefunktsioonide eest, mille kaudu patogeensed elemendid on kõige hõlpsamini tungida, kuna limaskesta epiteel on palju õhem ja õrnem kui tavalised nahaintegraadid..
- E-klass (IgE). Need spetsiifilised globuliinid suunavad oma toimet inimkeha mõjutavate parasiitnakkuste vastu. Need ilmuvad sõltumata sellest, millist elundisüsteemi parasiidid mõjutavad..
- D-klass (IgD). Seda klassi leidub alati isegi tervetel inimestel. Alla 10-aastastel lastel suureneb see järk-järgult, pärast mida absoluutse tervise tingimustes selle kogus ei muutu. Kui indikaator tõuseb üle normi, võib see viidata rasedusele, astmale, immuunpuudulikkusele jne..
ELISA jaoks on immunoglobuliinide IgG, IgM ja IgA kõige olulisemad tasemed. Nende krediidi põhjal saate teada, kas inimesel on olnud haigus varem või on ta hiljuti haigestunud, tal on välja kujunenud immuunsus või on tema keha kaitsetu patoloogia vastu.
Ensüümi immuunanalüüsi eelised ja puudused
Praegu on ELISA üks kõige täpsemaid ja tundlikumaid meetodeid. Selle on vastu võtnud meditsiini eri valdkondade spetsialistid ja see laiendab jätkuvalt selle ulatust..
Meetodi eelised
- Andmete suur täpsus.
- Tundlikkus (võimaldab tuvastada vajalikku ainet isegi patogeeni minimaalse esinemise korral proovis).
- Diagnoosimise võimalus haiguse esimestel päevadel või inkubatsiooniperioodil.
- Andmete kogumise kiirus, võrreldes teiste sarnase täpsusega meetoditega.
- Protsessi kõrge automatiseeritus ja minimaalne inimeste kaasatus, mis vähendab esineja täpsust.
- Andmete saamine patoloogilise protsessi staadiumi ja valitud ravi efektiivsuse kohta.
- Materjali valimisel valutu ja vähene invasiivsus.
Meetodi puudused
- Enamikul juhtudel võimaldab see teil määrata keha reageeringu patogeensele ainele, mitte patogeeni enda.
- Enne uuringut tuleb väidetav haigus täpselt teada saada, kuna test on väga spetsiifiline..
- Tehnilistest probleemidest, ravimite võtmisest, mitmete krooniliste haiguste või ainevahetushäirete samaaegsest esinemisest patsiendi kehas põhjustatud valenäitajate tõenäosus.
- Tulemuste tõlgendamine peaks toimuma ainult kõrgelt kvalifitseeritud spetsialisti poolt, kuna saadud andmete tõlgendamiseks on vajalik spetsiaalne väljaõpe ja suur hulk meditsiinilisi teadmisi teatud piirkonnas.
- ELISA on üsna haruldane analüüs, seetõttu ei tehta seda kõigis diagnostikalaborites..
- Meetod on üsna kallis, kuna laboris peab lisaks reagentidele olema ka kallis arvukalt seadmeid ja spetsiaalsetes instituutides toodetud antigeenide proovid.
Millistel juhtudel kasutage ensüümi immuunanalüüsi
Ensüümi immuunanalüüsi määramise näidustuste täielik loetelu on väga lai, see hõlmab peaaegu kõiki meditsiiniharusid.
Kõige sagedamini kasutatakse IFA-d sellistel eesmärkidel:
- nakkushaiguste avastamine;
- sugulisel teel levivate haiguste diagnoosimine;
- immuunsuse seisundi või üksikute autoimmuunhaiguste määramine;
- tuumorimarkerite tuvastamine;
- hormooni määramine.
Nakkus- ja viirushaiguste korral võimaldab tehnika tuvastada järgmised patoloogiad:
- igat tüüpi viirushepatiit;
- Epsteini-Barri viirus;
- kõik TORCHi nakkused;
- igat tüüpi sooleinfektsioonid;
- HIV
- süüfilis;
- enamus parasiitseid nakkusi;
- Helikobakterioos jne..
Lisaks võimaldab ELISA kiiresti ja tõhusalt määrata südameataki, hinnata keha reproduktiivset potentsiaali, tuvastada allergiaid, selle allikat jne..
Ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsi kasutatakse kliiniliste uuringute läbiviimisel uute ravimite väljatöötamise ajal ja nende mõju hindamiseks inimkehale.
Proovide tüübid ja nende valimise meetodid uurimistöö jaoks
Kõige sagedamini on ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsi uuritud materjal veri, mis võetakse patsiendi ulnarveenist. Proovid võetakse tühja kõhuga, peamiselt hommikul. Pärast verest valimist eraldatakse ja eemaldatakse need uuringut segavad vormitud rakud, jättes ainult seerumi.
Urogenitaalnakkuste diagnoosimisel muutuvad materjaliks sageli genitaalide limaskestadest, ureetrast või emakakaelast pärit lima, pärasoole proovid, kubeme ja muude kehaosade erosioonist või haavanditest tekkinud jäägid ja muud kehaosad. Smareid võib võtta suuõõnest, samuti ninaneelust.
Mõnikord kasutatakse raseduse ajal sünnitus- ja günekoloogilises praktikas ensüümi immuunanalüüsi, et määrata amnionivedeliku seisund. Sel juhul muutub amnionivedelik prooviks. Selleks võetakse väike kogus vedelikku, läbistades loote põie pika nõelaga. Võimalike riskide minimeerimiseks viiakse kõik manipulatsioonid läbi steriilse instrumendiga..
Sageli muutub materjal tserebrospinaalseks või seroosseks vedelikuks. See toimub kohaliku tuimestusega, mis süstitakse..
Kui uuringut suunab spetsialist, selgitage, millised materjalid on ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsi jaoks vajalikud. Sageli võetakse mitut tüüpi proove korraga või erinevatest kohtadest. Arst, kes väljastab saatekirja seda tüüpi uuringutele, peaks patsiendile rääkima ka ettevalmistamisest biomaterjali sünnitamiseks.
Ettevalmistus ensüümi immuunanalüüsiks
Pärast ensüümi immuuntesti saadud andmete täpsuse suurendamiseks tuleks materjali valimise ettevalmistamine toimuda järgmiselt:
- 10 päeva enne uuringut välistage antibiootikumid, viirusevastased ja antimükootilised ravimid;
- päevas on vaja välistada alkohol, suitsetamine ja narkootiliste ainete tarvitamine;
- samal perioodil on vaja vältida füüsilist ületreenimist;
- hoiatada väljakirjutavat spetsialisti kõigi ravimite eest, mida patsient võtab;
- raseduse või raseduse kahtluse korral teatage sellest arstile.
Parim, kui katsematerjalid valitakse hommikul tühja kõhuga..
Kui diagnoosi eesmärk on kindlaks teha hormonaalse tausta seisund, on oluline tagada eelõhtul rahulik olek ja vältida närvipinget. Naiste puhul määrab hormoonide vereloovutus selgelt igakuise tsükli perioodi, nagu arst ütleb kohtumise ajal.
2-3 päeva enne materjali valimist on vaja menüüst välja jätta praetud ja rasvased tooted ning enne hepatiidi analüüsi ei tohi süüa tsitrusvilju ega muid puu- ja köögivilju oranži ja kollase värvusega.
Ensüümi immuunanalüüsi tulemuste dekodeerimine
Kvalitatiivse uuringu tulemust tähistatakse tavaliselt märkidega “+” (leitud) või “-” (ei leitud).
Teatavate immunoglobuliinide rühmade olemasolu või puudumine võib teha järgmised järeldused:
- JgM (-), JgG (-), JgA (-) - haiguse immuunsussüsteem puudub täielikult (organism pole seda tüüpi antigeeni varem kohanud);
- JgM (-), JgG (+), JgA (-) - varem oli kokkupõrge selle antigeeni või vaktsiiniga;
- JgM (+), JgG (- / +), JgA (- / +) - äge patoloogiline protsess (tõenäoliselt primaarne);
- JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - kroonilise kulgemise protsess;
- JgM (+), JgG (+), JgA (+) - retsidiiv;
- JgM (-) - taastumise etapp.
Kvantitatiivsed väärtused sisaldavad suurt teabekoormust, kuid ainult raviarst saab neid tõlgendada, tuginedes varasematele näidustustele, patsiendi vanusele ja iga konkreetse haiguse normidele. Sel põhjusel ei saa te tulemusi ise hinnata..
Kui kaua tulemusi oodata on
Sellel tehnikal on palju sorte, sõltuvalt sellest, millise ajavahemiku jooksul käsitsi andmeid võetakse. ELISA diagnoosi keskmine kestus on 4-6 tundi, mis võimaldab teil tulemusi anda juba järgmisel päeval.
Pikimad meetodid võtavad näiteks kuni 10 päeva, näiteks HIV-nakkuse korral.
Kiireloomulise vajaduse korral on võimalik kasutada kiirmeetodeid, mille puhul vastus saadakse 1-2 tunni pärast.
Kust saab IFA testi?
Kuna seda tüüpi diagnoosimise seadmed on üsna kallid, ei saa kõik laborid seda osta. Lisaks on spetsiifilisi antigeene sisaldavate testide piiratud säilivusaeg (tavaliselt umbes aasta), seega vajavad need pidevat värskendamist..
Nendel põhjustel pole riiklikes meditsiiniasutustes kaugeltki alati IFA laboreid. Kõige sagedamini peate pöörduma suurte erameditsiini või suurte diagnostikakeskuste poole.
IFA uuringu läbiviimiseks peab laboril olema eriluba ning töötajad ja laborandid peavad läbima eriväljaõppe.
Enamasti soovitab arst konkreetse patsiendi uurimiseks suunanud diagnoosimiskeskuse või labori.
Ensüümi immuunanalüüs
Selle uuringu hind sõltub riigi piirkonnast ja teenust pakkuva kliiniku tasemest. Moskvas algab ühe antigeeni määramise miinimumhind 700 rublast. Kui on vaja tuvastada mitu immunoglobuliini korraga, võetakse hind kokku.
Kiireloomulise analüüsi korral suurenevad kulud 150-200 rubla võrra. iga antigeeni kohta.
Vaatamata suhteliselt kõrgetele kuludele võimaldab ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs muuta patsiendi läbivaatuse võimalikult informatiivseks ja kiireks, mis vähendab enne ravi toimumist ja võimaldab inimese seisundit kiiresti stabiliseerida..
Selles videos esitletakse filmi "Ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsi alused".
Ensüümi immuunanalüüs raseduse ajal
Nakkuslike patoloogiate õigeaegne tuvastamine aitab vältida tõsiste komplikatsioonide tekkimist. Üks kõige informatiivsemaid diagnostilisi meetodeid on ELISA. Ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs raseduse ajal on vajalik hematoloogiliste, autoimmuunhaiguste, nakkuste varajaseks avastamiseks.
Mis see on
IFA analüüs - mis see on? See on üks diagnostilisi meetodeid, mis määravad bioloogilises materjalis erinevate antikehade ja antigeenide koguse ja kvaliteedi..
Mida kasutatakse ensüümi immuunanalüüsis raseduse ajal:
Toimimispõhimõte põhineb organismi võimel sünteesida spetsiifilisi antikehi vastusena võõraste ainete tungimisele. Selle tulemusel moodustub antigeeni-antikeha kompleks, mis tuvastatakse ELISA abil.
Kui ametisse nimetatakse
ELISA meetodit peetakse üheks kõige täpsemaks diagnostiliseks meetodiks, selle usaldusväärsus on üle 90%. Analüüsi kasutatakse mitmesuguste raskete haiguste ja ohtlike seisundite tuvastamiseks..
Milliseid patoloogiaid saab tuvastada:
Ensüümidega seotud immunosorbentne test raseduse ajal võimaldab teil hinnata neerude, südame, veresoonte teatud patoloogiate tekke riski.
Diagnoosimiseks tuleb jälgida antikehade taset, mis võivad põhjustada lapsel tõsiseid neuroloogilisi häireid..
Vastunäidustused
ELISA-le pole rangeid vastunäidustusi. Kuid raseduse ajal on veres sageli hormoonide pidev muutus, analüüsi tuleb korrata mitu korda.
Ensüümi immuunanalüüsi ei määrata pärast vereülekannet, punktsiooni ja biopsia võtmist, hemolüüsi, operatsiooni.
Kuidas valmistada?
Usaldusväärsete diagnostiliste tulemuste saamiseks peate valmistuma ELISA analüüsiks.
- Veri annetatakse ainult tühja kõhuga. Viimane söögikord - 12 tundi enne uuringut.
- Vahetult enne vere loovutamist on vaja vältida aktiivset ja liigset füüsilist koormust, proovida mitte olla närvis. Enne analüüsi tuleb kindlasti piisavalt magada.
- 2 nädalat enne diagnoosi on vaja lõpetada antibakteriaalsete ja viirusevastaste ravimite võtmine.
Kui uuringuks on vaja genitaalide limaskestadelt määrdumist, siis 48 tundi enne testi tegemist on vaja loobuda seksuaalsetest kontaktidest. Viimane urineerimine - vähemalt 2 tundi enne biomaterjali võtmist.
Vereensüümi immuunanalüüsi päeval raseduse ajal ei tohiks te dušši ega vanni võtta.
Kuidas on
ELISA-s on mikrobioloogias mitmeid meetodeid - otsene, kaudne, konkureeriv, blokeeriv meetod. Kuid mis tahes meetodi keskmes on algoritm, mis seisneb immuunse ja ensümaatilise reaktsiooni rakendamises.
- Uurimistööks kasutatakse spetsiaalseid tablette, mis sisaldavad 96 rakku. Enne analüüsi töödeldakse iga süvendit spetsiaalse antigeeniga..
- Bioloogiline materjal tilgutatakse rakku. Antikehad ja antigeenid reageerivad, moodustavad tugevad sidemed..
- Aukudesse lisatakse immunoglobuliini antikehad ja märgistatud ensüümielemendid.
- Antikehade kontsentratsiooni mõõtmiseks kasutage optilist vedelikku.
- Antikehade kontsentratsioon arvutatakse spetsiaalse skaala abil..
Kaudset meetodit peetakse täpsemaks, kuna seerumi uurimisel läbib antikehade ja antigeenide topeltkontroll.
Tulemuste dešifreerimine
ELISA ajal tuvastati bioloogilises materjalis 3 tüüpi immunoglobuliinide olemasolu - IgA, IgG, IgM, IgE, IgD.
Vere ELISA - ärakiri:
- Tüüp M immunoglobuliinid. Ilmuvad kehas 1-3 nädalat pärast haiguse algust. Nad ringlevad veres 6-12 nädala jooksul, siis nende arv väheneb järk-järgult. IgM olemasolu veres näitab ägedat esmast patoloogilist protsessi, vajalik on kiireloomuline ravimite ravi.
- Tüüp G immunoglobuliinid. Neid saate tuvastada 4 nädalat pärast nakatumist, nad esinevad kehas mitu kuud. Haiguse ägeda käigu ajal suureneb nende tiiter 1,5-2 kuu jooksul. IgG esinemine näitab patogeenide suhtes immuunsuse olemasolu või hiljutist haigust. Seda tüüpi immunoglobuliinide kasv näitab uuesti nakatumist.
- A-tüüpi immunoglobuliinid: ilmuvad pärast 2–4-nädalast nakatumist, ringlevad kehas 4 nädalat ja hindavad ravi efektiivsust nende arvu järgi. Näitajate langus näitab paranemisprotsessi algust. Nende ilmumine veres pärast uimastiravi lõpetamist on märk haiguse üleminekust kroonilises staadiumis.
- IgE tüüpi immunoglobuliinide tuvastamist kasutatakse allergiliste ja parasiitide patoloogiate tuvastamiseks.
- IgD immunoglobuliinide sisaldus on tervetel inimestel vähesel arvul. Nende arvu suurenemine võib näidata sidekoe patoloogiate, bronhiaalastma ja immuunpuudulikkuse seisundite esinemist. Kasvu täheldatakse ka raseduse ajal.
- Nii IgA kui ka IgG esinemine veres on märk kroonilise patoloogilise protsessi olemasolust kehas.
- IgG ja IgM esinemine viitab kroonilise haiguse ägenemisele või sellele, et esmane nakkus leidis aset hiljemalt 2-3 kuud enne testi.
Kui ühtegi immunoglobuliini ei tuvastata, tähendab see immuunvastuse puudumist.
Positiivne tulemus võimaldab mitte ainult tuvastada patoloogiat, vaid ka kindlaks teha arenguetapp ja haiguse kulgu iseloom.
Lisaks antikehade tüübile määratakse nende aviditeet - antikehade sideme tugevus antigeeniga. See indikaator võimaldab teil hinnata nakkuse eeldatavat kestust..
Kasu
Immunkeemilistel analüüsidel on palju eeliseid, kuid on ka puudusi..
- madal hind ja saadavus;
- võime tuvastada haigusi varases arengujärgus ja kontrollida nende arengu dünaamikat;
- tulemuste saamise miinimumtingimused.
Puudused - konkreetset patogeeni tüüpi on võimatu kindlaks teha, sageli on valepositiivseid tulemusi. Valepositiivne vastus võib olla sidekoe ja liigeste haiguste, diabeedi, põletikuliste südamehaiguste korral.
Rasedatel naistel täheldatakse sageli ELISA analüüsi mittespetsiifilisi valepositiivseid tulemusi katsesüsteemide kõrge tundlikkuse tõttu.
Ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs raseduse ajal on usaldusväärne ja kiire meetod erinevate haiguste diagnoosimiseks. Pealegi on see emale ja beebile täiesti ohutu.
See on sageli ette nähtud rasedatele, kuid ohtlike patoloogiate vältimiseks soovitatakse seda teha eostamise kavandamisetapis.